Сегодня: 29.03.2024
RU / EN
Последнее обновление: 01.03.2024

Лекарственный патоморфоз глиобластомы 101.8 у крыс линии Wistar при лечении наноразмерной формой доксорубицина на основе полилактидных наночастиц

В.В. Федосеева, Е.А. Постовалова, А.С. Халанский, В.А. Разживина, С.Э. Гельперина, О.В. Макарова

Ключевые слова: экспериментальная глиобластома; доксорубицин; PLGA-наночастицы; полоксамер 188; лекарственный патоморфоз.

Цель исследования — изучение лекарственного патоморфоза глиобластомы 101.8 у крыс линии Wistar после лечения различными формами доксорубицина: наноразмерной формой на основе полилактидных наночастиц и субстанцией доксорубицина.

Материалы и методы. В работе использовали наноразмерную форму доксорубицина на основе наночастиц сополимера молочной и гликолевой кислот (PLGA). Исследование выполнено на 33 самцах крыс линии Wistar, получавших субстанцию доксорубицина (ДОКС) или доксорубицин, включенный в наночастицы (ДОКС-PLGA), в дозе 1,5 мг/кг массы тела на 2, 5 и 8-е сутки после перевивки опухоли. Перед введением лиофилизованные наночастицы ресуспендировали в воде (ДОКС-PLGA) или в 1% водном растворе полоксамера 188 (ДОКС-PLGA/Р188). На 14-е сутки после перевивки подсчитывали количество митотически делящихся и гибнущих опухолевых клеток, вычисляли коэффициент клеточного обновления опухоли. Количество и объемную долю кровеносных сосудов в опухолях определяли на гистологических срезах, окрашенных изолектином B4.

Результаты. По сравнению с нелечеными животными у крыс с глиобластомой 101.8, получавших лекарственные средства, на 6-е сутки после окончания лечения выявлено увеличение гибели и снижение пролиферативной активности опухолевых клеток, а также коэффициента клеточного обновления опухоли. При лечении ДОКС, ДОКС-PLGA/Р188 у животных наблюдалось снижение объемной доли и количества кровеносных сосудов в опухолях. Максимальная противоопухолевая активность по данным оценки патоморфоза глиобластомы 101.8 выявлена при лечении препаратом ДОКС-PLGA/Р188. Полученные результаты экспериментального исследования позволяют рассматривать ДОКС в PLGA-наночастицах, модифицированных Р188, как наиболее эффективное противоопухолевое средство.


Введение

Глиобластома — быстрорастущая низкодифференцированная опухоль головного мозга, плохо поддающаяся лечению. Продолжительность жизни больных с глиобластомой после установления диагноза редко превышает 12 мес [1]. Основной метод лечения — хирургическое удаление опухоли с последующей радио­лучевой терапией, в то время как химиотерапии отводится в основном лишь вспомогательная роль [2]. Одной из причин низкой эффективности химиотерапии при опухолях ЦНС является гематоэнцефалический барьер (ГЭБ), ограничивающий доступ большинства лекарственных веществ в мозг. В центральных зонах опухоли функции ГЭБ нарушаются, поскольку новообразованные сосуды, несовершенные в анатомическом, функциональном и гистологическом отношении, отличаются повышенной проницаемостью. Однако в зонах инфильтративного роста опухоли ГЭБ сохраняет функциональность, препятствуя созданию в этих зонах терапевтически эффективных концентраций лекарственных веществ [3]. Данный факт обусловливает актуальность поиска путей повышения эффективности химиотерапии опухолей мозга и, в частности, глиобластом.

Одним из перспективных направлений в этой области является применение систем доставки лекарственных веществ. Наночастицы на основе биополимеров способны доставить противоопухолевые вещества, которые без этих наночастиц лишь ограниченно проникают через ГЭБ. В опухоли наночастицы накапливаются и постепенно выделяют инкапсулированное лекарственное вещество, поддерживая его терапевтически эффективную концентрацию [3, 4].

В онкотерапии широко применяется антрациклиновый антибиотик доксорубицин (ДОКС). Его молекулы встраиваются в ДНК и повреждают ее, вызывают остановку пролиферации или гибель опухолевых клеток. Цитотоксическое действие доксорубицина обусловлено генерацией свободных форм кислорода и способностью ингибировать рост кровеносных сосудов в опухоли [5, 6]. Считается, однако, что, будучи субстратом Р-гликопротеина, доксорубицин не проникает через ГЭБ и потому не может использоваться для химиотерапии опухолей мозга. В то же время показано, что лечение глиобластомы 101.8 наноразмерными формами доксорубицина на основе полибутилцианоакрилатных (PBCA) и полилактидных (PLGA) наночастиц увеличивает выживаемость, продолжительность жизни животных, приводит к уменьшению объема опухоли и торможению ее роста [7–9].

Противоопухолевый эффект ДОКС-наночастиц усиливается, если поверхность наночастиц модифицирована полоксамером 188 (плюроник F68, Р188 и др.) [8]. Полоксамеры — полимерные соединения, блок-сополимеры полиоксиэтилена (гидрофобная часть мо­лекулы) и полиоксипропилена (гидрофильная часть молекулы), их разное сродство к воде придает полоксамерам в водном растворе свойства поверхностно-активных веществ. Они используются как транспортные системы для доставки лекарственных веществ к пораженным органам и тканям [10]. Полоксамер 188 увеличивает растворимость и всасываемость различных гидрофобных соединений, обладает тромболитическим действием, улучшает реологию крови, встраивается в клеточные мембраны, способствуя устранению их дефектов, активирует фагоцитоз [11]. После введения наночастиц PLGA в кровь полоксамер 188, адсорбированный на их поверхности, способствует адсорбции аполипопротеинов Е и А, которые взаимодействуют с рецепторами LDL, экспрессированными на мембранах эндотелиальных клеток, образующих ГЭБ, и таким образом опосредуют эндоцитоз наночастиц в эти клетки. Наночастицы затем проникают в мозг посредством трансцитоза [10].

Для оценки противоопухолевой эффективности химио- и радиотерапии используют «золотой стандарт» — морфологическое исследование, которое в сочетании с морфометрическим и молекулярно-биологическим методами позволяет прогнозировать рецидивирование и выживаемость у онкологических больных [12].

С целью определения эффективности лечения с использованием различных форм доксорубицина — его субстанции или наноразмерной формы на основе полилактидных частиц — у крыс линии Wistar выполнена сравнительная оценка лекарственного патоморфоза глиобластомы 101.8 после противоопухолевой терапии.

Материалы и методы

Наночастицы получали из субстанции ДОКС (Sicor S.p.A, Италия) и сополимера молочной и гликолевой кислот PLGA (Resomer RG 502H; Evonik Röhm, Германия) методом двойных эмульсий при соотношении ДОКС:PLGA как 1:10 [4]. После удаления органических растворителей полученную наносус­пензию лиофилизировали с добавлением криопротектора (1% маннита). Средний диаметр полученных частиц, определенный методом фотонной корреляционной спектроскопии (Zetasizer Nano ZS; Malvern, Великобритания), составлял ~100 нм, степень включения доксорубицина ~90%. Перед введением животным лиофилизированные наночастицы ресуспендировали в воде (ДОКС-PLGA) или в 1% водном растворе полоксамера 188 (ДОКС-PLGA/Р188).

Исследование выполнено на 33 самцах крыс линии Wistar массой тела 150–200 г. При работе с животными руководствовались Приказом №199н «Об утверждении Правил надлежащей лабораторной практики» (Россия, 2016) и «Международными рекомендациями (этический кодекс) по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (CIOMS и ICLAS, 2012), а также «Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств» (Миронов А.Н. и др., 2012). При этом неукоснительно соблюдались этические принципы, установленные Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей (Страсбург, 2006). Исследование было одобрено биоэтической комиссией НИИ морфологии человека.

Глиобластома 101.8 крысы была впервые получена и поддерживается в коллекции НИИ морфологии человека [13]. Ткань опухоли трансплантировали в головной мозг крыс под наркозом (Золетил 100 в дозе 6 мг/100 г массы тела животного). Методика трансплантации опухоли детально описана в предыдущей работе [7].

Животные с имплантированными опухолями были разделены на 4 группы в зависимости от получаемых препаратов: субстанции доксорубицина (ДОКС; n=6); наноразмерной формы доксорубицина на основе наночастиц PLGA, модифицированных полоксамером 188 (ДОКС-PLGA/Р188; n=9) или немодифицированных (ДОКС-PLGA; n=11). В качестве контроля использовали нелеченых животных (n=7). Препараты вводили внутривенно на 2, 5 и 8-е сутки после трансплантации опухоли в дозе 1,5 мг/кг.

С целью гистологического исследования глиобластомы 101.8 животных выводили из эксперимента на 14-е сутки после имплантации опухоли (6-е сутки после лечения). Головной мозг фиксировали в 10% забуференном растворе формалина, изготавливали гистологические срезы и окрашивали их гематоксилином и эозином.

Для оценки пролиферативного потенциала, гибели клеток и вычисления коэффициента клеточного обновления глиобластомы 101.8 подсчитывали количество митозов и гибнущих клеток на стандартной площади гистологического среза (65 025 мкм2; х400). В каждом наблюдении в зависимости от размера опухоли подсчет проводили в 5–10 полях зрения. Коэффициент клеточного обновления (ККО) опухоли вычисляли по формуле: ККО = число митозов / число гибнущих клеток.

Кровеносные сосуды в глиобластоме 101.8 выявляли с помощью гистохимической реакции с изолектином В4 (Vector Lab, США), при которой маркируются эндотелиальные клетки. Оценивали количество сосудов в поле зрения при увеличении 200. Методом точечного счета с помощью сетки Г.Г. Автандилова [14] определяли объемную долю кровеносных сосудов.

Статистическая обработка данных проведена с применением пакета программ Statistica 6.1, использован непараметрический метод. Характеристикой экспериментальных групп служила медиана (Me) и квартильный размах (25; 75%). Для сравнения экспериментальных групп был применен однофакторный дисперсионный анализ ANOVA, для множественного сравнения — метод Данна и метод Коновера.

Результаты

При морфологическом исследовании глиобластомы 101.8 у крыс разных экспериментальных групп все опухоли характеризовались высокой клеточностью, выраженной атипией опухолевых клеток с гиперхромией ядер, полиморфизмом по форме и размерам. Среди опухолевых клеток было много митотически делящихся (рис. 1, а, б). Встречались патологические митозы: концентрические митозы, полая метафаза, асимметричные митозы, колхициновые митозы. Отмечалось много гибнущих клеток с гомогенным базофильным ядром или фрагментацией ядер, гомогенной эозинофильной цитоплазмой, клеток-теней с плохо определяемыми контурами, слабобазофильными ядрами и вакуолизированной цитоплазмой (рис. 1, в, г). Наблюдался инфильтративный периваскулярный и перинейрональный рост опухоли в окружающую ткань головного мозга: опухолевые клетки в пограничной зоне образовывали скопления вокруг сосудов и гибнущих нейронов. Вокруг нейронов они нередко формировали железистоподобные структуры.


fedoseeva-ris-1.jpg

Рис. 1. Морфологическая характеристика глиобластомы 101.8:

группа без лечения: а — фигуры митоза; б — многополюсный митоз; гибнущие клетки: в — группа ДОКС; г — группа ДОКС-PLGA/P188; картина «звездного неба»; окраска гематоксилином и эозином; увеличение: а — 400; в — 640; б, г — 1000

Во всех опухолях выявлялось большое количество кровеносных сосудов, которые формировали скопления в виде сосудистых «розеток» (рис. 2). Сосуды были с деформированными просветами, округлой или овальной формы и тонкой стенкой, представленной эндотелием и небольшим количеством тонких волокон, также определялись сосуды щелевидной формы с пролиферацией эндотелия и с частично сформированной стенкой (рис. 3).


fedoseeva-ris-2.jpg

Рис. 2. Морфологическая характеристика кровеносных сосудов в глиобластоме 101.8:

а — ДОКС P188; кровеносные сосуды с тонкими стенками; б — ДОКС-PLGA; сосудистая розетка — скопление сгруппированных кровеносных сосудов овальной формы с тонкими стенками; окраска гематоксилином и эозином; увеличение: а — 400, б — 640

В опухолях часто выявлялись мелкие и обширные кровоизлияния — от единичных до множественных. Во многих опухолях, особенно с относительно большими размерами, определялись очаговые некрозы, среди них встречались некрозы с палисадообразным расположением опухолевых клеток. В перитуморальной зоне выявлялись сетчатый, периваскулярный и перицеллюлярный отек, гибель нейронов, которые были гиперхромными по типу гипоксических нейронов, а также с явлением цитолиза.


fedoseeva-ris-3.jpg

Рис. 3. Гистохимическая реакция с изо­лектином В4 — маркером эндотелиальных клеток:

а — группа без лечения, сосуды с широкими деформированными про­светами и тонкими стенками; б, в, г — сосуды с частично сформированными стенками и щелевидным просветом: б — ДОКС; в — ДОКС-PLGA; г — ДОКС-PLGA/P188; увеличение: а, г — 100; б, в — 200

Выявленные морфологические особенности экспериментальной глиобластомы 101.8 соответствуют основным характеристикам глиобластомы человека (высокая атипия опухолевых клеток, наличие большого количества кровеносных сосудов, некрозов и кровоизлияний), что позволяет предполагать одинаковые реакции на лечение.

По сравнению с крысами, не получавшими лечения, у животных экспериментальных групп, леченных ДОКС, ДОКС-PLGA и ДОКС-PLGA/Р188, выявлены признаки лекарственного патоморфоза: размеры опухолей были значительно меньше; у большинства животных некрозы отсутствовали; у половины крыс обнаружены клетки-«монстры» — от единичных в препарате и поле зрения до 5–7 клеток в поле зрения (рис. 4). Кровеносные сосуды были в основном щелевидными с частично сформированными тонкими стенками и деформированными просветами. Следует отметить, что в пределах каждой из исследованных групп животных выраженность лекарственного патоморфоза варьировала.


fedoseeva-ris-4.jpg

Рис. 4. Морфологическая характеристика клеток глиобластомы 101.8:

а — ДОКС-PLGA/P188; б — ДОКС-PLGA; опухоли с высокой клеточностью из полиморфных атипичных клеток с гиперхромными ядрами и узким ободком цитоплазмы; среди атипичных клеток — многоядерные клетки-«монстры»; окраска гематоксилином и эозином; увеличение: а — 640; б — 400

По сравнению с нелечеными во всех группах животных, получавших лечение, число гибнущих клеток в опухоли было увеличено, а показатели митозов снижены. Минимальное количество митозов отмечалось у крыс с глио­бластомой после лечения ДОКС-PLGA/Р188 (табл. 1).


fedoseeva-tablitsa-1.jpg

Таблица 1. Количество митотически делящихся, гибнущих клеток опухоли и коэффициент клеточного обновления у крыс с глиобластомой, % (Me [25; 75])


По сравнению с нелечеными животными в опухолях после лечения практически во всех группах крыс было снижено абсолютное количество кровеносных сосудов. В группе ДОКС-PLGA/Р188 этот показатель был самым низким, в группе ДОКС-PLGA он не отличался от группы без лечения.

При морфометрическом исследовании глиобластомы 101.8 показатель медианы объемной доли сосудов уменьшался во всех группах леченых животных. В группах ДОКС и ДОКС-PLGA/Р188 этот показатель был низким (табл. 2).


fedoseeva-tablitsa-2.jpg

Таблица 2. Объемная доля и количество кровеносных сосудов в глиобластоме 101.8 у крыс при введении разных форм доксорубицина, % (Ме [25; 75])


Таким образом, по сравнению со всеми экспериментальными группами количество и объемная доля кровеносных сосудов в опухоли были статистически значимо ниже в группе животных, получавших ДОКС-PLGA/Р188.

Обсуждение

Выявленные морфологические изменения в глио­бластоме 101.8 при воздействии химиопрепарата ДОКС и его наносомальной формы следует расценивать как проявления лекарственного патоморфоза. Проблема лекарственного патоморфоза детально охарактеризована Е.Ф. Лушниковым [15]: патоморфоз — это как общие, так и местные проявления опухолевого роста под влиянием какого-либо воздействия. В современном понимании патоморфоз (от греч. pathos — болезнь и morphosis — формирование) — стойкое изменение клинической и морфологической картины болезни под влиянием факторов окружающей среды. Вопрос о морфологических критериях лекарственного («индуцированного», «лечебного», «терапевтического») патоморфоза опухолей продолжает оставаться дискуссионным и во многом зависит от природы опухоли, вида воздействия, механизма действия, режима введения препаратов и т.п. Наиболее значимыми параметрами патоморфоза являются: активность и характер роста опухоли, наличие и выраженность атипии клеток, соотношение объемных долей стромы и паренхимы, полиморфизм либо единообразие формы и размера клеток, ядерно-цитоплазматическое соотношение, наличие и количество митозов, гибнущих клеток, дистрофические изменения в опухолевых клетках. При этом важно учитывать характер ангиогенеза, оцениваемый по микрососудистой плотности, суммарному периметру сосудов и суммарной их площади, наличию очагов некроза и геморрагий и т.д. [16–20].

Стандарт оценки лекарственного патоморфоза злокачественных опухолей головного мозга человека до сих пор не разработан. Основой для оценки морфологических изменений при лечении экспериментальной глиобластомы 101.8 является классификация C. Daumas-Duport [21], которая используется для прогнозирования течения глиобластомы у человека. Классификация основана на четырех морфологических признаках: атипия ядер, митотическая активность, пролиферация эндотелиальных клеток, некрозы (0 — отсутствие признака или его сомнительное проявление; 1 — наличие). Прогностическая значимость митотического индекса и индекса гибели клеток при лечении опухоли подтверждена на достаточно большом числе злокачественных опухолей разных локализаций [18, 22].

При изучении гистологических препаратов глиобластомы 101.8 во всех опытных группах у большинства животных, получавших лечение, были выявлены описанные признаки лекарственного патоморфоза: уменьшение объемов опухолей, более редкое развитие некрозов. Во многих опухолях у леченых животных определялись клетки-«монстры», что расценивается как один из признаков регрессии опухоли после химиотерапии [23].

Патоморфоз глиобластомы 101.8 под действием всех исследованных препаратов включал также интенсификацию процессов гибели опухолевых клеток. Глиобластомы животных группы ДОКС-PLGA/Р188 характеризовались увеличенным процентом гибели опухолевых клеток по сравнению с группой крыс, леченных ДОКС.

Все лекарственные формы доксорубицина снижали пролиферативную активность опухолевых клеток и увеличивали их гибель. В связи с этим коэффициент клеточного обновления у леченых животных был ниже, чем у нелеченых.

Глиобластома 101.8 характеризуется высокой васкуляризацией, а ее снижение служит одним из показателей оценки эффективности лечения опухоли [15]. Абсолютное число кровеносных сосудов опухоли и их объемная доля снижались во всех группах животных, подвергавшихся лечению. Однако наилучший результат отмечен для группы животных, получавших ДОКС-PLGA/P188.

Полученные данные коррелируют с ранее описанными результатами исследования противоопухолевой активности наноразмерных форм доксорубицина в отношении глиобластомы 101.8. Так, в работах T. Hekmatara и соавт. [5], А.С. Халанского и соавт. [24], S.C. Steiniger и соавт. [9] показано, что лекарственный патоморфоз экспериментальной глиобластомы 101.8 у крыс линии Wistar при лечении наносомальной формой доксорубицина на основе наночастиц PBCA характеризуется уменьшением размеров опухоли и степени ее васкуляризации, распространенности некрозов, снижением пролиферативного индекса [25], а также уменьшением объемной плотности сосудов и некрозов в опухоли. Высокая эффективность лечения глиобластомы 101.8 наноразмерной формой доксорубицина на основе наночастиц PLGA была показана также S. Wohlfart и соавт. [26], которые использовали полуколичественную оценку степени выраженности некрозов и «сосудистых розеток».

Заключение

Все лекарственные формы доксорубицина снижают пролиферативную активность опухолевых клеток и увеличивают их гибель, тем самым уменьшая коэффициент клеточного обновления у леченых животных. Наиболее эффективными лекарственными формами, снижающими пролиферативную активность и увеличивающими гибель опухолевых клеток, являются ДОКС-PLGA и ДОКС-PLGA/P188. При введении разных лекарственных форм доксорубицина по сравнению с группой нелеченых животных объемная доля кровеносных сосудов в опухоли снижается только в группах крыс, леченных ДОКС и ДОКС-PLGA/P188.

На основе оценки патоморфоза глиобластомы 101.8 по принятым морфологическим признакам максимальная противоопухолевая активность принадлежит препарату ДОКС-PLGA/Р188. Полученные результаты экспериментального исследования позволяют рассматривать ДОКС в PLGA-наночастицах, ресуспендированных в 1% водном растворе полоксамера Р188, как наиболее эффективное противоопухолевое средство.

Финансирование исследования. Исследование выполнено при финансовой поддержке федеральной целевой программы «Развитие фармакологической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу» (государственный контракт №13411.1008799.13.144).

Конфликт интересов. Конфликты интересов, связанные с данным исследованием, отсутствуют.


Литература

  1. Johnson D.R., Omuro A.M.P., Ravelo A., Sommer N., Guerin A., Ionescu-Ittu R., Shi S., Macalalad A., Uhm J.H. Overall survival in patients with glioblastoma before and after bevacizumab approval. Curr Med Res Opin 2018; 34(5): 813–820, https://doi.org/10.1080/03007995.2017.1392294.
  2. Furnari F.B., Fenton T., Bachoo R.M., Mukasa A., Stommel J.M., Stegh A., Hahn W.C., Ligon K.L., Louis D.N., Brennan C., Chin L., DePinho R.A., Cavenee W.K. Malignant astrocytic glioma: genetics, biology, and paths to treatment. Genes Dev 2007; 21(21): 2683–2710, https://doi.org/10.1101/gad.1596707.
  3. Maeda H. Macromolecular therapeutics in cancer treatment: the EPR effect and beyond. J Control Release 2012; 164(2): 138–144, https://doi.org/10.1016/j.jconrel.2012.04.038.
  4. Malinovskaya Y., Melnikov P., Baklaushev V., Gabashvili A., Osipova N., Mantrov S., Ermolenko Y., Maksimenko O., Gorshkova M., Balabanyan V., Kreuter J., Gelperina S. Delivery of doxorubicin-loaded PLGA nanoparticles into U87 human glioblastoma cells. Int J Pharm 2017; 524(1–2): 77–90, https://doi.org/10.1016/j.ijpharm.2017.03.049.
  5. Hekmatara T., Bernreuther C., Khalansky A.S., Theisen A., Weissenberger J., Matschke J., Gelperina S., Kreuter J., Glatzel M. Efficient systemic therapy of rat glioblastoma by nanoparticle-bound doxorubicin is due to antiangiogenic effects. Clin Neuropathol 2009; 28(3): 153–164, https://doi.org/10.5414/npp28153.
  6. Thorn C.F., Oshiro C., Marsh S., Hernandez-Boussard T., McLeod H., Klein T.E., Altman R.B. Doxorubicin pathways: pharmacodynamics and adverse effects. Pharmacogenet Genomics 2011; 21(7): 440–446, https://doi.org/10.1097/fpc.0b013e32833ffb56.
  7. Федосеева В.В., Халанский А.С., Мхитаров В.А., Цвет­ков И.С., Малиновская Ю.А., Максименко О.О., Гель­­перина С.Э., Балабаньян В.Ю., Разживина В.А., Го­ре­ликов П.Л., Михайлова Л.П., Макарова О.В. Про­ти­во­опухолевая активность доксорубицина в составе поли(лактид-ко-гликолидных) наночастиц при экс­пе­ри­мен­тальной глиобластоме. Клиническая и экспе­ри­­мен­тальная морфология 2017; 2(22): 65–71.
  8. Gelperina S., Maksimenko O., Khalansky A., Vanchugova L., Shipulo E., Abbasova K., Berdiev R., Wohlfart S., Chepurnova N., Kreuter J. Drug delivery to the brain using surfactant-coated poly(lactide-co-glycolide) nanoparticles: influence of the formulation parameters. Eur J Pharm Biopharm 2010; 74(2): 157–163, https://doi.org/10.1016/j.ejpb.2009.09.003.
  9. Steiniger S.C., Kreuter J., Khalansky A.S., Skidan I.N., Bobruskin A.I., Smirnova Z.S., Severin S.E., Uhl R., Kock M., Geiger K.D., Gelperina S.E. Chemotherapy of glioblastoma in rats using doxorubicin-loaded nanoparticles. Int J Cancer 2004; 109(5): 759–767, https://doi.org/10.1002/ijc.20048.
  10. Kreuter J. Drug delivery to the central nervous system by polymeric nanoparticles: what do we know? Adv Drug Deliv Rev 2014; 71: 2–14, https://doi.org/10.1016/j.addr.2013.08.008.
  11. Moghimi S.M., Hunter A.C. Poloxamers and poloxamines in nanoparticle engineering and experimental medicine. Trends Biotechnol 2000; 18(10): 412–420, https://doi.org/10.1016/s0167-7799(00)01485-2.
  12. Westerterp M., van Westreenen H.L., Reitsma J.B., Hoekstra O.S., Stoker J., Fockens P., Jager P.L., Van Eck-Smit B.L., Plukker J.T., van Lanschot J.J., Sloof G.W. Esophageal cancer: CT, endoscopic US, and FDG PET for assessment of response to neoadjuvant therapy — systematic review. Radiology 2005; 236(3): 841–851, https://doi.org/10.1148/radiol.2363041042.
  13. Коллекция экспериментальных опухолей нервной системы и нейральных опухолевых клеточных линий. URL: http://ckp-rf.ru/usu/498710/.
  14. Автандилов Г.Г. Морфология в патологии. М: Медицина; 1973; 277 с.
  15. Лушников Е.Ф. Лучевой патоморфоз опухолей человека. М: Медицина; 1977; 328 с.
  16. Лавникова Г.А. Некоторые закономерности лучевого патоморфоза опухолей человека и их практическое использование. Вестник АМН СССР 1976, 6: 13–19.
  17. Патологоанатомическая диагностика опухолей че­ло­века. Под ред. Краевского Н.А., Смолянникова А.В., Сар­кисова Д.С. М: Медицина; 1993; 560 с.
  18. Staunton M.J., Gaffney E.F. Tumor type is a determinant of susceptibility to apoptosis. Am J Clin Pathol 1995, 103(3): 300–307, https://doi.org/10.1093/ajcp/103.3.300.
  19. Казанцева И.А., Гаганов Л.Е. Морфологические пока­затели клеточного обновления в карциномах желудка и их прогностическое значение. Архив патологии 2014; 4: 3–8.
  20. Takagi H., Azuma K., Tsuka T., Imagawa T., Osaki T., Okamoto Y. Antitumor effects of high-temperature hyperthermia on a glioma rat model. Oncol Lett 2014; 7(4): 1007–1010, https://doi.org/10.3892/ol.2014.1852.
  21. Daumas-Duport C., Scheithauer B., O’Fallon J., Kelly P. Grading of astrocytomas. A simple and reproducible method. Cancer 1988; 62(10): 2152–2165, https://doi.org/10.1002/1097-0142(19881115)62:102152::aid-cncr28206210153.0.co;2-t.
  22. Лушников Е.Ф., Абросимов А.Ю. Гибель клетки (апоптоз). М: Медицина; 2001; 190 с.
  23. Chang F., Deere H., Mahadeva U., George S. Histopathologic examination and reporting of esophageal carcinomas following preoperative neoadjuvant therapy: practical guidelines and current issues. Am J Clin Pathol 2008; 129(2): 252–262, https://doi.org/10.1309/ccr3qn4874yjdjj7.
  24. Халанский А.С., Хекматара Т., Бернройтер К., Руб­цов Б.В., Кондакова Л.И., Матчке Й., Кройтер Й., Глатцел М., Гельперина С.Э., Швец В.И. Морфологическая оценка противоопухолевого эффекта наносомальной фор­мы доксорубицина в отношении экспериментальной глиобластомы у крыс. Биофармацевтический журнал 2011; 3(2): 41–50.
  25. Халанский А.С., Кондакова Л.И. Перевиваемый штамм глиомы крысы 101.8. Биологическая характерис­ти­ка. Клиническая и экспериментальная морфология 2013; 4: 63–69.
  26. Wohlfart S., Khalansky A.S., Gelperina S., Maksimenko O., Bernreuther C., Glatzel M., Kreuter J. Efficient chemotherapy of rat glioblastoma using doxorubicin-loaded PLGA nanoparticles with different stabilizers. PLoS One 2011; 6(5): e19121, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0019121.


Журнал базах данных

pubmed_logo.jpg

web_of_science.jpg

scopus.jpg

crossref.jpg

ebsco.jpg

embase.jpg

ulrich.jpg

cyberleninka.jpg

e-library.jpg

lan.jpg

ajd.jpg