Сегодня: 17.07.2024
RU / EN
Последнее обновление: 01.07.2024
Цитокиновый профиль CCR6</span><sup style="background-color: initial;">+</sup><span style="background-color: initial;"> T-хелперов, выделенных из крови пациентов с язвенной болезнью, ассоциированной с <i>H. pylori</i>-инфекцией

Цитокиновый профиль CCR6+ T-хелперов, выделенных из крови пациентов с язвенной болезнью, ассоциированной с H. pylori-инфекцией

В.Ю. Талаев, М.В. Светлова, И.Е. Заиченко, Е.В. Воронина, О.Н. Бабайкина, Н.В. Неумоина, К.М. Перфилова, О.В. Уткин, Е.Н. Филатова
Ключевые слова: Т-лимфоциты хелперы; CCR6; иммуномагнитная сепарация; рецепторы хемокинов; цитокины; язвенная болезнь.
2020, том 12, номер 3, стр. 33.

Полный текст статьи

html pdf
1303
1210

Ранее мы обнаружили, что при H. pylori-ассоциированной язвенной болезни в крови увеличивается содержание CCR6+ Т-хел­пе­ров с фенотипом эффекторов/эффекторных Т-клеток памяти. Зрелый фенотип и экспрессия хемокинового рецептора CCR6, участвующего в миграции лимфоцитов в воспаленную слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, наводят на мысль о вовлечении этих клеток в иммунный ответ при исследуемом заболевании. Для оценки патогенетической роли данных клеток требуется исследование их функциональных свойств: в частности, продукции провоспалительных цитокинов, вовлеченных в патогенез заболевания.

Цель исследования — оценить изменения содержания в крови провоспалительных типов зрелых CCR6+ Т-хелперов при H. pylori-ассоциированной язвенной болезни.

Материалы и методы. CСR6+ Т-хелперы выделяли с помощью модифицированного для выполнения данного исследования метода иммуномагнитной сепарации. Количество Т-хелперов 1-го и 17-го типов (Тх1 и Тх17) и клеток со смешанными свойствами Тх1 и Тх17 (Тх1/Тх17) определяли с помощью метода оценки внутриклеточных цитокинов.

Результаты. Исходно мы планировали активировать неразделенные мононуклеарные клетки периферической крови ex vivo и оценить содержание продуцентов цитокинов в группе зрелых CСR6+ Т-хелперов, выделенных в гейт при анализе результатов проточной цитометрии. Однако существенные изменения фенотипа Т-хелперов не позволили надежно идентифицировать исследуемую группу клеток после активации. В дальнейшем мы использовали двухэтапную иммуномагнитную сепарацию, с помощью которой из крови выделяли функционально активные зрелые CСR6+ Т-хелперы с чистотой более 90%. Выход этих клеток из крови пациентов с H. pylori-ассоциированной язвенной болезнью в 9 раз превышал выход из крови здоровых доноров. Активация очищенных CСR6+ Т-хелперов выявила повышенное содержание Тх1, Тх17 и Тх1/Тх17 в этой группе клеток при язвенной болезни. Из 1 мл крови больных выделялось в 18,1 раза больше CСR6+ Тх1, в 19,4 раза больше CСR6+ Тх17 и в 21,1 раза больше CСR6+ Тх1/Тх17 по сравнению с кровью здоровых доноров.

Заключение. Содержание зрелых CСR6+ Т-хелперов c провоспалительной активностью значительно возрастает в крови пациентов с H. pylori-ассоциированной язвенной болезнью.

  1. Талаев В.Ю., Талаева М.В., Воронина Е.В., Заи­­ченко И.Е., Неумоина Н.В., Перфилова К.М., Бабай­кина О.Н. Экспрессия хемокиновых рецепторов на Т-хел­перах крови при заболеваниях, ассоциированных с Helicobacter pylori: хроническом гастродуодените и язвенной болезни. Инфекция и иммунитет 2019; 9(2): 295–303, https://doi.org/10.15789/2220-7619-2019-2-295-303.
  2. Danesh J. Helicobacter pylori infection and gastric cancer: systematic review of the epidemiological studies. Aliment Pharmacol Ther 1999; 13(7): 851–856, https://doi.org/10.1046/j.1365-2036.1999.00546.x.
  3. Amieva M., Peek R.M. Jr. Pathobiology of Helicobacter pylori-induced gastric cancer. Gastroenterology 2016; 150(1): 64–78, https://doi.org/10.1053/j.gastro.2015.09.004.
  4. Kusters J.G., van Vliet A.H.M., Kuipers E.J. Pathogenesis of Helicobacter pylori infection. Clin Microbiol Rev 2006; 19(3): 449–490, https://doi.org/10.1128/CMR.00054-05.
  5. Graham D.Y., Opekun A.R., Osato M.S., El-Zimaity H.M.T., Lee C.K., Yamaoka Y., Qureshi W.A., Cadoz M., Monath T.P. Challenge model for Helicobacter pylori infection in human volunteers. Gut 2004; 53(9): 1235–1243, https://doi.org/10.1136/gut.2003.037499.
  6. Nurgalieva Z.Z., Conner M.E., Opekun A.R., Zheng C.Q., Elliott S.N., Ernst P.B., Osato M., Estes M.K., Graham D.Y. B-cell and T-cell immune responses to experimental Helicobacter pylori infection in humans. Infect Immun 2005; 73(5): 2999–3006, https://doi.org/10.1128/IAI.73.5.2999-3006.2005.
  7. Eaton K.A., Suerbaum S., Josenhans C., Krakowka S. Colonization of gnotobiotic piglets by Helicobacter pylori deficient in two flagellin genes. Infect Immun 1996; 64(7): 2445–2448.
  8. Tan S., Tompkins L.S., Amieva M.R. Helicobacter pylori usurps cell polarity to turn the cell surface into a replicative niche. PLoS Pathog 2009; 5(5): e1000407, https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1000407.
  9. Isaacson P. Immunoperoxidase study of the secretory immunoglobulin system and lysozyme in normal and diseased gastric mucosa. Gut 1982; 23(7): 578–588, https://doi.org/10.1136/gut.23.7.578.
  10. Velin D., Bachmann D., Bouzourene H., Michetti P. Reduction of Helicobacter infection in IL-10–/– mice is dependent on CD4+ T cells but not on mast cells. Helicobacter 2008; 13(5): 361–369, https://doi.org/10.1111/j.1523-5378.2008.00614.x.
  11. Moyat M., Velin D. Immune responses to Helicobacter pylori infection. World J Gastroenterol 2014; 20(19): 5583–5593, https://doi.org/10.3748/wjg.v20.i19.5583.
  12. Kronsteiner B., Bassaganya-Riera J., Philipson C., Viladomiu M., Carbo A., Abedi V., Hontecillas R. Systems-wide analyses of mucosal immune responses to Helicobacter pylori at the interface between pathogenicity and symbiosis. Gut Microbes 2016; 7(1): 3–21, https://doi.org/10.1080/19490976.2015.1116673.
  13. Eaton K.A., Ringler S.R., Danon S.J. Murine splenocytes induce severe gastritis and delayed-type hypersensitivity and suppress bacterial colonization in Helicobacter pylori-infected SCID mice. Infect Immun 1999; 67(9): 4594–4602.
  14. Gray B.M., Fontaine C.A., Poe S.A., Eaton K.A. Complex T cell interactions contribute to Helicobacter pylori gastritis in mice. Infect Immun 2013; 81(3): 740–752, https://doi.org/10.1128/IAI.01269-12.
  15. Caruso R., Fina D., Paoluzi O.A., Del Vecchio Blanco G., Stolfi C., Rizzo A., Caprioli F., Sarra M., Andrei F., Fantini M.C., MacDonald T.T., Pallone F., Monteleone G. IL-23-mediated regulation of IL-17 production in Helicobacter pylori-infected gastric mucosa. Eur J Immunol 2008; 38(2): 470–478, https://doi.org/10.1002/eji.200737635.
  16. Shi Y., Liu X.F., Zhuang Y., Zhang J.Y., Liu T., Yin Z., Wu C., Mao X.H., Jia K.R., Wang F.J., Guo H., Flavell R.A., Zhao Z., Liu K.Y., Xiao B., Guo Y., Zhang W.J., Zhou W.Y., Guo G., Zou Q.M. Helicobacter pylori induced Th17 responses modulate Th1 cell responses, benefit bacterial growth, and contribute to pathology in mice. J Immunol 2010; 184(9): 5121–5129, https://doi.org/10.4049/jimmunol.0901115.
  17. Wang C., Kang S.G., Lee J., Sun Z., Kim C.H. The roles of CCR6 in migration of Th17 cells and regulation of effector T-cell balance in the gut. Mucosal Immunol 2009; 2(2): 173–183, https://doi.org/10.1038/mi.2008.84.
  18. Villablanca E.J., Cassani B., von Andrian U.H., Mora J.R. Blocking lymphocyte localization to the gastrointestinal mucosa as a therapeutic strategy for inflammatory bowel diseases. Gastroenterology 2011; 140(6): 1776–1784, https://doi.org/10.1053/j.gastro.2011.02.015.
  19. Singh S.P., Zhang H.H., Tsang H., Gardina P.J., Myers T.G., Nagarajan V., Lee C.H., Farber J.M. PLZF regulates CCR6 and is critical for the acquisition and maintenance of the Th17 phenotype in human cells. J Immunol 2015; 194(9): 4350–4361, https://doi.org/10.4049/jimmunol.1401093.
  20. Перфилова К.М., Неумоина Н.В., Бутина Т.Ю., Куз­не­цова И.В., Шутова И.В., Ларионова Т.В., Ефимова Е.И. Опыт использования метода полимеразной цепной реакции для исследования маркеров Heliсobacter pylori. Медицинский альманах 2016; 2: 52–56.
  21. Talayev V.Yu., Zaichenko I.Ye., Babaykina O.N., Lomunova M.A., Talayeva E.B., Nikonova M.F. Ex vivo stimulation of cord blood mononuclear cells by dexamethasone and interleukin-7 results in the maturation of interferon γ-secreting effector memory T cells. Clin Exp Immunol 2005; 141(3): 440–448, https://doi.org/10.1111/j.1365-2249.2005.02863.x.
Talayev V.Yu., Svetlova M.V., Zaichenko I.E., Voronina E.V., Babaykina O.N., Neumoina N.V., Perfilova K.M., Utkin O.V., Filatova E.N. Cytokine Profile of CCR6+ T-Helpers Isolated from the Blood of Patients with Peptic Ulcer Associated with Helicobacter pylori Infection. Sovremennye tehnologii v medicine 2020; 12(3): 33, https://doi.org/10.17691/stm2020.12.3.04


Журнал базах данных

pubmed_logo.jpg

web_of_science.jpg

scopus.jpg

crossref.jpg

ebsco.jpg

embase.jpg

ulrich.jpg

cyberleninka.jpg

e-library.jpg

lan.jpg

ajd.jpg